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泌尿生殖道支原體和衣原體檢測的現(xiàn)狀和存在問題
[關(guān)鍵詞] 支原體 衣原體 檢測健康網(wǎng)訊:
[摘 要］對泌尿生殖道支原體和衣原體檢測的現(xiàn)狀進行綜述，著重分析目前支
原體和衣原體檢測中存在的亟待解決的問題。?
解脲脲原體（UU）、人型支原體（MH）、生殖支原體（MG）和沙眼衣原體（C
T）都是寄生在泌尿生殖道的病原體，常引起泌尿生殖道疾患。支原體和衣原體感
染不但是非淋菌性尿道炎（NGU）的最主要病因(90%以上)，且已成為發(fā)病率最高的
性傳播疾病，已越來越受到重視。但由于技術(shù)局限，目前對其檢測仍存在不少問題
亟待解決。筆者結(jié)合自己的工作經(jīng)驗，綜述并分析泌尿生殖道支原體和衣原體檢測
的現(xiàn)狀和存在問題，以裨于試劑的改進和臨床檢測方法的提高。?
1 檢測現(xiàn)狀
1.1 培養(yǎng)法 支原體可用人工合成培養(yǎng)基培養(yǎng)，由于不具有甾醇合成能力，培
養(yǎng)系統(tǒng)應(yīng)添加含甾醇等長鏈不飽和脂肪醇豐富的物質(zhì)，一般采用SP?4培養(yǎng)基加馬
血清。MG生長所需的營養(yǎng)成分復(fù)雜，生長極緩慢，一般需2周～3月。CT必須采用細
胞培養(yǎng)，一般用McCoy細胞系進行培養(yǎng)，但細胞培養(yǎng)需專業(yè)化技術(shù)、試劑和設(shè)備，
要求較高，周期也較長，目前臨床一般不采用，僅在科研單位進行科研活動，或作
為新診斷試劑方法學(xué)評價的金標(biāo)準(zhǔn)。培養(yǎng)法不能快速檢測支原體感染，一般UU和M
H需2～3天才能出結(jié)果。不過隨著實驗水平提高，市面上已出現(xiàn)一些24 h可出結(jié)果
的試劑。但MG尚未實現(xiàn)24 h培養(yǎng)出結(jié)果，因此臨床上不采用培養(yǎng)法檢測MG，僅用于
科研活動。
目前臨床培養(yǎng)法檢測UU和MH多采用液體培養(yǎng)基，加樣培養(yǎng)變色判斷結(jié)果。理論
上這種變色也可能由于其它微生物代謝而發(fā)生，因此要求變色后過濾除菌，再接種
到固體培養(yǎng)基上觀察菌落。若培養(yǎng)基選用適當(dāng)抗生素，有效地抑制雜菌生長，單純
液體培養(yǎng)基結(jié)果就有相當(dāng)高的臨床可信度。即使有個別變色是雜菌所致，標(biāo)本病人
也有細菌性炎癥，采用抗生素也不為過。
1.2 免疫法 采用此法檢測的試劑目前臨床較常用。一般為間接法（ELISA法或
金標(biāo)法）檢測抗體，比較而言金標(biāo)法檢測抗體的試劑用得更多；而用于檢測支原體
抗原的試劑目前尚未商品化。此類試劑一般采用夾心法檢測CT特異性脂多糖抗原(
LPS)，影響較大的有金標(biāo)試劑和免疫熒光試劑。由于免疫反應(yīng)的特異性和酶催化底
物反應(yīng)的高效性或熒光信號的高敏性，故此類試劑理論上靈敏度和特異性都較高。
1.3 PCR法 此類衣原體試劑有定性和定量（多是PCR酶免試劑）兩類，而支原
體試劑只有定性一類。PCR反應(yīng)有較高的靈敏度，對實驗條件、試劑以及操作人員
的要求都較高，操作不當(dāng)易造成錯誤判斷，并且PCR定性試劑一般沒有藥品批準(zhǔn)文
號，臨床上使用應(yīng)慎重。定量試劑有藥品批準(zhǔn)文號，但面市不久，尚處于推廣中。
科研單位使用PCR試劑一般用于鑒定血清型，而醫(yī)療單位使用PCR定量試劑多用于臨
床療效觀察。
1.4 快速生化法 由于支原體生化酶反應(yīng)速度和特異性都存在問題，目前尚無
檢測支原體快速生化法試劑，但衣原體已有此方法學(xué)試劑。國內(nèi)開發(fā)的生殖道CT生
化檢測試劑即為此類，它是根據(jù)CT侵染上皮細胞后產(chǎn)生的獨特的化學(xué)結(jié)構(gòu)，配以生
化酶試劑與之反應(yīng)，觀察變色與否判斷結(jié)果。臨床觀察資料表明，以細胞培養(yǎng)為金
標(biāo)準(zhǔn)，此試劑的靈敏度和特異性分別為87%以上和97%以上，加之價格較低，具有良
好的應(yīng)用前景。
2 存在問題
2.1 由于支原體在人群中廣泛存在，許多正常人也有低滴度抗體水平，單純根
據(jù)一次抗體檢測結(jié)果，很難判斷標(biāo)本病人是既往感染還是現(xiàn)癥感染，再次測定支原
體抗體滴度增加時方可判為支原體陽性。為此要求檢測支原體抗體的應(yīng)為定量試劑
，而目前國內(nèi)間接法檢測支原體抗體的試劑都是定性試劑，且有一定的市場占有率
，這就說明了為什么許多病人檢測抗體為陽性而培養(yǎng)則為陰性［1］，也在一定程
度上影響了病情的確診。國內(nèi)有些科研單位正研制間接法檢測支原體抗原的試劑［
2］，直接檢測病原體抗原，因此比檢測抗體試劑有更高的特異性和準(zhǔn)確性。基于
支原體抗體定性檢測試劑的可靠性存在問題，在檢測支原體抗體定量試劑和支原體
抗原試劑商品化之前，宜采用液體培養(yǎng)法。
2.2 MG診斷問題 以往資料顯示MG感染率不超過5%，鑒于培養(yǎng)周期長，有關(guān)研
究又不多，臨床一般不檢測MG。但有資料表明MG的陽性率并不低（14.1%）［3］，
以前資料的低感染率可能是試劑的靈敏度偏低所致。因此進一步開展MG的研究，開
發(fā)臨床適用的試劑，應(yīng)是當(dāng)前工作重點之一。
2.3 支原體計數(shù)的可靠性問題 目前國內(nèi)市場上銷售的支原體藥敏試劑，一般
都帶支原體計數(shù)，計數(shù)的前提必須是標(biāo)本采集量的標(biāo)準(zhǔn)化，若標(biāo)本采集量不標(biāo)準(zhǔn)，
計數(shù)就是空談。血清標(biāo)本比較容易定量采集，而支原體測定所取的標(biāo)本是分泌物或
中段尿，則不容易定量采集。
對于分泌物來講，采集標(biāo)本量時多時少，如果這次取的分泌物少，而分泌物中
支原體數(shù)量≥10?4，采用所謂的可計數(shù)的試劑檢測可能會得到支原體數(shù)量<10?4
的結(jié)果；同樣中段尿是一個定性且很泛的概念，每次不可能取到相同位置的中段尿
，也不可能標(biāo)準(zhǔn)化。既然取樣不能標(biāo)準(zhǔn)化，計數(shù)就不科學(xué)，可能給臨床治療工作帶
來誤導(dǎo)。市面上的試劑帶計數(shù)功能的可能原因：①廠家沒有意識到標(biāo)本采集量的標(biāo)
準(zhǔn)化問題；②故弄噱頭和跟風(fēng)。衣原體PCR定量試劑也是測分泌物，存在同樣問題
。
2.4 發(fā)病率高而陽性率低的問題 隨著與國際接軌，發(fā)病率可比性會增加。西
方國家NGU中UU陽性率一般為40%～60%（含多重感染，下同），MH陽性率一般為20
%～50%，CT陽性率一般為25%～55%［4～6］。而縱觀近十年國內(nèi)臨床資料，UU陽性
率一般為20%～30%，MH陽性率一般為10%～20%，CT陽性率一般為16.2%～27.0%［7
］，國內(nèi)明顯比國外低，臨床實際的陽性率更低，究其原因，可做以下分析。
支原體試劑靈敏度偏低的原因：①沒有充分考慮支原體生長增殖所需的最佳條
件；②僅考慮其它微生物存在造成的假陽性而沒考慮某些微生物存在會抑制支原體
的生長繁殖；③為了對UU和MH鑒別，培養(yǎng)基一般添加野株天然耐藥的抗生素，但臨
床株可能在進化過程中突變而對這種抗生素敏感，導(dǎo)致假陰性的結(jié)果。我們在臨床
工作中發(fā)現(xiàn)一種支原體試劑，性病門診UU陽性率為60.65%，MH陽性率為23.26%，與
國外資料比較符合，并且與國內(nèi)程文獻報道（58.97%）接近［8］，與此對比國內(nèi)
另一種同類試劑UU陽性率為22.17%，MH陽性率為9.35%。有些正常人通過液體培養(yǎng)
基培養(yǎng)可能判為陽性，這些人雖無任何癥狀，但其作為支原體攜帶者可看作泌尿生
殖道炎癥性疾病的危險人群，臨床上也應(yīng)予以高度重視。
衣原體試劑陽性率低的原因更多，除去實驗操作影響，① 衣原體是寄生在上
皮細胞內(nèi)，采樣若沒采到上皮細胞，勢必造成假陰性；② 抗原提取不徹底（只有
破壞衣原體細胞壁，其LPS才溶出），或抗原被破壞（LPS 82℃分解破壞），也可
造成假陰性；③試劑盒生產(chǎn)所用的單抗相應(yīng)的衣原體血清型可能存在地區(qū)差異或變
異，因為在臨床工作中我們發(fā)現(xiàn)，某同一批號衣原體試劑在有些地區(qū)（并不一定是
性病高發(fā)區(qū)）的陽性率比較接近廠家標(biāo)示的水平，而在另外一些地區(qū)（有些還是性
病高發(fā)區(qū)）的陽性率則遠遠低于廠家標(biāo)示的水平；④ 試劑本身靈敏度低。?
［參 考 文 獻］
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［作者單位］鄭州博賽生物工程有限責(zé)任公司,河南 鄭州 450001
［作者簡介］王則宇（1972-），男，河南省平輿人，工程師，理學(xué)學(xué)士，主要從
事微生物快速檢測和藥敏鑒定的研究。
中國皮膚性病學(xué)雜志
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