系統(tǒng)性紅斑狼瘡病人自身抗體的變化及意義

　　系統(tǒng)性紅斑狼瘡病人自身抗體的變化及意義
　　
　　作者：劉豐海 原江水 宋衛(wèi)青
　　
　　【關(guān)鍵詞】  紅斑狼瘡，系統(tǒng)性；自身抗體；診斷
　　
　　系統(tǒng)性紅斑狼瘡（SLE） 是一種多器官、多系統(tǒng)的復(fù)雜自身免疫性疾病， 以自身抗體的產(chǎn)生和免疫復(fù)合物的聚集為特征。研究表明， SLE病人在嚴(yán)重的免疫功能異常，表現(xiàn)為淋巴細(xì)胞減少，淋巴細(xì)胞亞群異常，B 細(xì)胞異�；钴S，病人體內(nèi)產(chǎn)生多種自身抗體，如抗核抗體（ANA）、抗雙鏈DNA（dsDNA）抗體和可提取性核抗原（ENA）抗體。本文對SLE病人血清中的自身抗體進(jìn)行檢測分析，旨在探討這些自身抗體在SLE發(fā)病和診斷中的作用。
　　
　　1  臨床資料
　　
　　1.1  一般資料
　　
　　收集2007年1——12月在我院診斷為SLE的病人血清262份，診斷均符合1982 年美國風(fēng)濕病學(xué)會修訂的SLE分類標(biāo)準(zhǔn)。262例中，男35例，女227例；年齡18——75歲，平均（38.3±15.6）歲。另選健康查體者96例作為正常對照組，男21例，女75例；年齡21——76歲，平均（45.5±14.2）歲。
　　
　　1.2  檢測方法
　　
　�、賾�(yīng)用間接免疫熒光法檢測病人血清中的ANA,選用人上皮細(xì)胞Hep2和大鼠肝組織切片作為抗原，試劑為德國歐蒙公司產(chǎn)品。待檢血清行1∶100稀釋，陽性者再做1∶1 000和1∶10 000稀釋，稀釋標(biāo)本與抗原在生物薄片反應(yīng)板上共同孵育30 min,洗片，加入FITC標(biāo)記的二抗孵育30 min,洗片，甘油封片，熒光顯微鏡下觀察反應(yīng)結(jié)果。②免疫印跡法檢測ENA多肽抗體譜：包括抗dsDNA抗體、抗SSA、抗SSB、抗Sm和抗U1?RNP等，試劑均為德國歐蒙公司產(chǎn)品。將包被了抗原的實(shí)驗(yàn)?zāi)�條平放于溫育槽中，加入1.5 mL緩沖液，振蕩孵育5 min,棄液，加入1.5 mL已稀釋的1∶100待檢血清，振蕩孵育30 min,清洗液清洗3次，每次5 min,加入酶標(biāo)記的抗人IgG血清再振蕩孵育30 min,清洗3次后加底物顯色，以試劑公司提供的陽性質(zhì)控條帶標(biāo)準(zhǔn)判斷膜條上的陽性結(jié)果。
　　
　　1.3  檢測結(jié)果
　　
　　1.3.1  ANA  262例SLE病人ANA滴度1∶100陽性者253例（96.5%），1∶1 000陽性者153例（58.3%），1∶10 000陽性者58例（22.1%），且熒光類型多為核均質(zhì)型和核顆粒型。正常對照組96例中ANA滴度1∶100陽性者8例（8.3%），無1∶1 000和1∶10 000陽性者。SLE病人的ANA陽性率顯著高于對照組，差異具有顯著性（χ2=276.8,P<0.01）。
　　
　　1.3.2  ENA抗體譜  262例SLE病人抗dsDNA抗體陽性者138例（52.7%），抗SSA抗體陽性者92例（35.1%），抗SSB抗體陽性者54例（20.6%），抗Sm抗體陽性者33例（12.5%），抗U1?RNP抗體陽性者56例（21.3%）。正常對照組96例均為陰性。
　　
　　2  討論
　　
　　隨著實(shí)驗(yàn)方法的不斷改進(jìn)及醫(yī)學(xué)生物學(xué)的進(jìn)步，對ANA的理解已不再局限于核成分，而是指抗核酸和核蛋白抗體的總稱，其靶抗原分布不僅存在于細(xì)胞核，還包括細(xì)胞漿、細(xì)胞骨架、細(xì)胞的分裂周期等，ANA檢測是一個重要的SLE篩選試驗(yàn)。本文中262例病人血清ANA的陽性率為96.5%,與文獻(xiàn)報道基本一致[1].但ANA出現(xiàn)在多種風(fēng)濕病中，在某些肝病病人血清中也檢測出ANA,所以ANA在SLE的診斷中僅有篩查價值。SLE的特征是產(chǎn)生大量致病性ENA,尤其是抗dsDNA抗體具有較高特異性，幾乎僅發(fā)現(xiàn)于SLE病人中。本研究中以免疫印跡法檢測抗dsDNA抗體的陽性率為52.7%.
　　
　　SLE病人外周血大量凋亡淋巴細(xì)胞可通過釋放過量自身抗原的方式誘導(dǎo)一系列自身抗體的產(chǎn)生，從而參與SLE發(fā)生[2].其中，ENA是在鹽水中可溶解的一系列抗原，在各種自身免疫性疾病中呈現(xiàn)不同的組合。檢測這些抗體，除有助于SLE的診斷和分型外，還有助于檢測病人的伴發(fā)疾病�？筪sDNA抗體與SLE活動相平行，可作為治療評估指標(biāo)，對SLE的診斷靈敏度低但特異度高�？筍m抗體是SLE的標(biāo)志性抗體，只表達(dá)于SLE病人中，特異性達(dá)到100%,但陽性率只有12.5%.抗SSA抗體和抗SSB抗體主要見于干燥綜合征的病人中，其在SLE病人中陽性率也較高，分別達(dá)到35.1%和20.6%,此與SLE病人常并發(fā)干燥綜合征有關(guān)。多個自身抗體的聯(lián)合檢測， 可提高SLE免疫學(xué)診斷的陽性率，彌補(bǔ)某個指標(biāo)呈陰性時難以判定的不足。
　　
　　【參考文獻(xiàn)】
　　
　　[1]鄒自英，李素華，陳莉。 13種自身抗體檢測對SLE的診斷價值及臨床意義[J]. 細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志， 2007,23（5）：443?446.
　　
　　[2]初開秋，韓俐。 SLE病人外周血淋巴細(xì)胞早期凋亡狀態(tài)的檢測[J]. 齊魯醫(yī)學(xué)雜志， 2003,18（1）：15?17.

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